甘油含量 (Glycerol)測(cè)定試劑盒

（適用于做組織樣本）

測(cè)定原理:

在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化為 3-磷酸甘油，再被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫:在過(guò)氧化氫酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醒亞胺，光密度值與甘油濃度成正比。

所需設(shè)備：

酶標(biāo)儀、可見(jiàn)光分光光度計(jì) (721、722 型)、生化分析儀。

操作過(guò)程：

1、樣本處理:詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)或本公司-技術(shù)文章部分關(guān)于樣本處理的說(shuō)明。測(cè)定組織和細(xì)胞同時(shí)需要測(cè)定蛋白濃度?？捎帽舅?A045-2 總蛋白定量測(cè)試盒(考馬斯亮藍(lán)法)或者 A045-3、A045-4 總蛋白定量測(cè)試盒(BCA 法)進(jìn)行蛋白濃度的測(cè)定。

2、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋

用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體，將 4mM 甘油標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 mol/L，通常 4~6 管即可，注意設(shè)置 0 濃度對(duì)照反應(yīng)管。

計(jì)算：

1、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算甘油濃度。Excel 作圖步驟: 各標(biāo)準(zhǔn)管 OD 值為y軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為x軸。 鼠標(biāo)左鍵圈住數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊做圖向?qū)?，選擇-散點(diǎn)圖-，點(diǎn)擊-完成-。@ 鼠標(biāo)右鍵點(diǎn)圖上的某一點(diǎn)，點(diǎn)擊-添加趨勢(shì)線-，點(diǎn)擊-選項(xiàng)-，點(diǎn)擊-顯示公式-和-R2值-。

2、以 mg 蛋白濃度或細(xì)胞數(shù)校正甘油含量。

甘油含量 (Glycerol)測(cè)定試劑盒