九九热爱视频精品,天天看夜夜嗷嗷叫国产,免费人妻av无码专区,久久99国产精一区二区三区

首頁 > 資料下載 > 組織游離膽固醇測試盒(酶法)說明書

組織游離膽固醇測試盒(酶法)說明書

點擊次數(shù):1209     發(fā)布時間:2021/6/7
提 供 商: 信帆生物 資料大小:
圖片類型: 下載次數(shù): 29
資料類型: PDF 瀏覽次數(shù): 1209
詳細介紹: 文件下載    

組織游離膽固醇測試盒(酶法)(Tissue free cholesterol )

 

描述:在實體組織和細胞內(nèi),膽固醇酯既是構(gòu)成細胞質(zhì)膜的成分,也是細胞內(nèi)脂滴的主要組分。細胞內(nèi)膽固醇過度聚集與動脈粥樣硬化泡沫細胞形成密切相關(guān)。實體組織和細胞的膽固醇測定遠比血液膽固醇測定復雜。本試劑盒避免了有毒的有機溶劑抽提、繁雜的氮氣吹干和脂質(zhì)復溶等步驟,采用高效能試劑裂解細胞和提取膽固醇,優(yōu)化了酶學反應和操作步驟,簡單易行,靈敏度高,線性范圍20~5000 µmol/L。

 

原理:本試劑盒采用WHO、中國《全國檢驗操作規(guī)程》的酶學方法,結(jié)合經(jīng)典GPO Trinder酶學反應1,2,原理如下:(1) 膽固醇酯酶分解膽固醇酯為游離膽固醇。(2) 膽固醇氧化酶將游離膽固醇氧化,反應過程產(chǎn)生過氧化氫。(3) 在過氧化物酶催化下進行生色反應,在550nm有大吸收峰,光密度值與膽固醇濃度成正比。

 

參考文獻

1Trinder P. Ann. Clin. Biochem. 1969, 6: 24-27.

   2、Barham D and Trinder P. Analyst. 1972, 97: 142-145

 

適于測定樣品:(1) 動物實體組織     (2) 培養(yǎng)細胞      (3) 細胞膜組分

 

組成 (105次微板測定或301 ml比色杯測定)

(1)    裂解液 50 ml    (2)R1試劑 16 ml    (3)R2試劑 4 ml     (4)5 mmol/L膽固醇標準品0.5 ml

 

儲存:4 ºC,儲存三個月

 

所需設備:酶標儀、生化分析儀或721、722型可見光分光光度計。佳工作波長550nm,如無此波長建議優(yōu)先選用570nm、次選530、490nm

 

操作步驟;

組織細胞裂解:

裂解前,組織或細胞用PBS洗滌2次去除殘存血液或培養(yǎng)基血清,以免影響膽固醇測定。

1)      培養(yǎng)細胞裂解:

消化、離心收集細胞或直接在培養(yǎng)皿內(nèi)裂解。通常6孔板單孔約2x106個細胞,75cm2瓶約1x107細胞。按比例每1x106細胞加0.1ml裂解液,震蕩混勻,靜置10分鐘。

2)      細胞膜成分:

5x106細胞制備的細胞膜組分,加入0.1-0.2ml裂解液(應根據(jù)預實驗調(diào)整裂解液的量),震蕩混勻,靜置10分鐘。

      3)     動物組織裂解:

切記要預先將新鮮組織剪切稱重后再進行保存。組織凍存后再進行解凍、剪切、稱重可能會產(chǎn)生嚴重的測量誤差。離心管精確稱重,加入組織塊后再稱重,二者相減(即減量稱重法)計算組織重量(100mg)。強烈建議按比例每1mg組織加10µl裂解液以減少樣品間蛋白和脂質(zhì)含量變異而產(chǎn)生的誤差。(注意;裂解液用量在1ml或更多可保證有效的裂解與脂質(zhì)提取)。用電動高速勻漿器或手動玻璃勻漿器破碎組織。(不超聲方法,因其不能*和均勻破碎。應根據(jù)預實驗調(diào)整初始的組織細胞加入量),而后靜置10分鐘。

組織細胞裂解液處理

1.    取適量上清液轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管,進行步驟2的操作。余下的裂解液用BCA法蛋白定量試劑盒進行蛋白含量測定,或-20ºC儲存。

2.    可選的優(yōu)化步驟70ºC加熱10分鐘,可能出現(xiàn)絮狀沉淀。(此步驟即可在組織量多、膽固醇含量高時采用)。

3.    室溫2000g離心5分鐘,取上層清液用于酶學測定。

注意:如果得到上清的上層有較多的白色乳濁樣小顆粒,重復步驟23。

三、工作溶液配制: 4:1比例,取4 ml試劑R11 ml試劑R2混勻,立即使用或4ºC保存<1天,變色棄去。

四、標準品稀釋:5 mM膽固醇標準品用無水乙醇稀釋為2500、1250、625、312.5、156、7839µmol/L。通常稀釋4個點即可。注意設置零濃度空白對照管。

五、含量測定:

1.    190 µl工作溶液加入微板。

2.    在各工作液中,分別加入10 µl (5~10µl) 空白對照溶液(無水乙醇或蒸餾水均可)、標準品、待測樣品。樣品體積不可超過20µl。如測量值超過線性范圍可用裂解液稀釋,根據(jù)稀釋倍數(shù)計算濃度。

3.    37ºC25ºC室溫反應20分鐘然后進行測定。(延長反應時間可能使游離膽固醇值增加,進而使游離膽固醇的數(shù)值與總膽固醇值接近。)

4.    先用蒸餾水(或無水乙醇)+工作液的空白管調(diào)零,然后測定各管OD值。

5.    繪制標準曲線并計算濃度。

Excel作圖步驟:各標準管OD值為y軸,標準品濃度為x軸。(1)鼠標左鍵圈住數(shù)據(jù),點擊-做圖向?qū)?/font>-,選擇-散點圖-,點擊-完成-(2)鼠標右鍵點圖上的某一點,點擊 -添加趨勢線-,點擊 -選項-,點擊 -顯示公式- -R2-。

6.    以每mg蛋白濃度或細胞數(shù)校正膽固醇含量。

  

組織膽固醇酯測定:需同分別測定組織總膽固醇和游離膽固醇,二者的差值即為膽固醇酯含量,參見以下說明。

 

說明:

1. 維生素C>0.18g/L、血紅蛋白>2g/L、還原劑二硫蘇糖醇、巰基乙醇、高濃度EDTA干擾測試。

2. 不同類型的組織細胞內(nèi)總膽固醇和游離膽固醇的比例差異很大。延長反應時間可能使游離膽固醇值增加因而使其值與總膽固醇值接近。由差值計算求得的膽固醇酯的值,主要適合血液樣品測定,可能不很適合細胞內(nèi)膽固醇酯測定。其原因主要與細胞內(nèi)膽固醇酯和游離膽固醇的合成、轉(zhuǎn)運、外流、儲存、分解、再酯化等諸多動態(tài)生物過程的非線性的高度復雜性有關(guān),還與現(xiàn)有測量方法的局限性有關(guān)。膽固醇()的含量以及代謝方式在肝細胞、巨噬細胞、肌肉細胞、成纖維細胞等不同類型的細胞中存在巨大差異。有時以差值計算的膽固醇酯出現(xiàn)背離和偏差,甚至為負值。如果出現(xiàn)這種情況,建議在數(shù)據(jù)分析時采用膽固醇酯/總膽固醇比值,而非膽固醇酯絕對值;或者嘗試用同位素標記方法、薄層層析、HPLC等方法測定膽固醇酯,或許會有改善。

 

 
聯(lián)系方式 二維碼

服務熱線

13764793648

掃一掃,添加微信

日韩精品真人荷官无码 成人av在线播放一区二区 久久久久久久久久久免费精品 国产微拍精品一区在线观看 欧美一区二区不卡视频免费观看 免费国产吹潮视频在线 97人妻免费视频 国产精品一区99久久久国产aaa精品国产91久久久久久国产又黄又粗又爽又色国产精品亚洲第一区 无码在线网址观看 亚洲中文字幕在线第26 国产69精品久久久久99尤物 亚洲精品无码AⅤ片影音先锋 为手机用户提供应用资源分享 精品无码AV 国语自产精品视频在线看 国产成人无码一区二区在线播放 国产精品国产精品国产三级普 女人与拘做受AAAAA片 国产精品国产三级国产专区5o 免费无码又黄又爽又刺激 国产中文欧美 在线看av的网站 婷婷国产精品无码一区二区三区 真实国产精品VR专区 粉嫩小仙女扒开双腿自慰 免费在线黄色电影 欧美综合区自拍亚洲综合图 超碰人人摸 禁止18岁啪啪啪啪国产视频 国产黄色视频www视频网 天堂在线最新版中文 久久免费视频1 国产精品久久久久久久久动漫 最近最新MV在线观看免费高清 日韩欧美三区四区在线观看 久久国产亚洲精品无码视频 女无遮挡h肉动漫在线观看 欧美亚洲国产一区二区三区 日本tv欧美tv天堂 国产精品国产三级国产AV剧情 亚洲精品卡一卡三卡四卡乱码 曰韩无码精品免费视频一区二区 欲妇荡岳丰满少妇岳 亚洲国产精品无码aaa片 在线观看国产成人av片 日韩精品成人亚洲专区 久久丫精品国产免费 美女精品永久福利在线 免费无码又爽又高潮视频 免费人成黄页在线 老妇XXXXX性开放 久久亚洲色一区二区三区 在线观看亚洲精品自拍 欧美日韩免费专区在线 天天做天天爱夜夜爽 最近中文字幕高清电影 亚洲无码在线免费观看视频 小仙女自慰呻吟出白浆 激动五月升综合网 两个人看的www高清免费中文 欧美三级不卡在线观看 色橹橹欧美在线观看视频 欧美一级片免费看 国产一国产二国产三国产四国产五 制服丝袜中文字幕在线 午夜性色福利刺激无码 无码av免费不卡在线观看 九龙精品久久久 一级做a爰片久久免费 免费放黄网站在线播放 公交车大龟廷进我身体里视频 亚洲午夜影院在线 亚洲人成中文电影 一区二区三区欧美 秘书边打电话边被躁bd视频 久久亚州精品国产精品婷婷 色婷婷综合缴情综在线播放 免费黄色网站国产 欧美大片在线观看你懂的视频 无码孕妇孕交在线观看 色老汉综合国产日韩av 麻豆视频传媒入口 亚洲婷婷五月丁香综合在线 亚洲AV自慰白浆喷水网站少妇 日韩精品无码av中文无码版 玖玖精品视频99 成年男女免费视频网站在线观看 午夜理论片在线观看免费 国产麻豆日韩欧美久久 国模无码视频一区二区三区 精品人妻一区二区三区小视频 久久精品免视看国产成人不卡 韩国激情高潮无遮挡hd 免费黄色av 国产情侣久久久久AⅤ免费 少妇av一二三区在线播放 韩国三级在线观看 一区二区不卡性爱无码在线播放 国产尻逼视频 国产国拍亚洲精品永久app 99国产综合精品久久久久 国产欧美日韩久久va 国产粉嫩00福利福利福利 久久久久久久久久久97 摸男朋友下面越摸越硬 在线视频国产一区不卡 成人免费区一区二区三区 一区二区三区日韩一区二区中文 久久综合噜噜激激的五月天 影音先锋一区二区 AV无码人妻一区二区三区在线 欧美一区在线观看视频 国产色视频免费 国产综合精品一区二区 麻豆国产av 久久黄色精品视频 久久免费看黄A级毛片动漫女和马 亚洲a欧美v在线观看 国产三级久久久久精品三级 残暴变态极端BDSM残忍 99热精品国产三级在线观看 国产voyeur精品偷窥222 天天爱天天做天天爽夜夜揉 avtt天堂网久久精品 美女自卫慰黄网站kk444 97免费人妻在线视频 亚洲高清无码黄色 人妻人人澡人人添人人爽人人玩 香蕉久久精品精品 精品一区二区久久久久网站 欧美和黑人xxxx猛交视频 精品无码A∨一区二区三区不卡 免费黄片在线看 亚洲国产另类久久久精品网站天堂 九色17v蜜芽亚洲 午夜无码一区二区三区在线 av片免费国产手机在线精品 琪琪电影网午夜理论片 欧洲成人午夜精品无码区久久 亚洲AⅤ无码无在线观看 越南小少妇bbwbbwbbw 国内精品51视频在线观看 亚洲国产日韩在线观看 50路60路老熟妇啪啪 97人妻无码一区二区精品免费 最近中文字幕完整版2018一页 91免费国产视频 伊人天天久久大香线蕉AV色 最近免费观看高清韩国日本大全 а√资源新版在线天堂 蜜桃羞羞片网站入口~ 亚洲日韩国产欧美精品v 婷婷五月中文字幕在线欧美 野花WWW成人免费视频 久久综合亚洲一区二区三区色 亚洲精品视 黄色成年人在线 亚洲精品97久久中文字幕无码 亚洲一区二区三区99久久 饥渴女上位高潮呻吟在线播放 日韩精品一区二区三区四区五区 99久久久无码国产精品不卡 国产欧美一区二区精品性色99 亚洲日韩福利在线 合盈影视手机版在线观看 日韩一区二区三区激情在线 亚洲精品第一在线观看视频 成年免费A级毛片免费看无码 狠狠噜日日噜夜夜 大胆顶级欧美A级视频 无码福利写真片视频在线播放 91久久99日本一区高清 成人午夜电影大全在线观看 乱码人妻一区二区三区 美女黄色网站在线观看 中国少妇内射XXXXⅹHD 久久精品国产精品青草APP 免费人成视频激情999 国产?v一区二区区别 超清首页国产亚洲丝袜 人与动人物a级毛片中文 精品无码久久久久久尤物 一本色道无码DVD中文字幕 欧美日韩在线视频一区二区 亚洲爆乳无码一区二区三区 欧洲激情无码一区二区三区 在线观看国产一区亚洲bd 亚洲成a×人片在线观看主页 日本边添边爱边做视频电影 视频一区亚洲视频直播app下载 一区二区三区91 人妻少妇精品无码专区动漫 色多多a级毛片免费看 67194熟妇在线观看线路1 一区二区在线免费看 麻豆日韩区久久综合 国产手机在线片无码观看 都市激情一区 久久久久久一级毛片免费野外黑人无遮挡 亚洲国产成人欧美在线观看 欧美视频一区二区三区 欧美激情一区二区三区 国产无遮挡又黄又爽不要VIP软件 精品午夜一区二区三区在线观看 人妻无码一区二区三区在线 欧美精品日韩精品一卡 好吊妞国产高清免费视频 国产欧美日韩一区 无码人妻一区二区精品视频 美女一區二區在線觀看 真人一级毛片免费的视频 2020国产一级在线观看 精品久久综合婷婷网 国产无遮挡又黄又爽不要vip网站 国产粗话肉麻对白在线播放 国产精品黄色大片 精品一区二区三区免费站 国产亚洲精品福利视频在线观看 91k国产在线观看尤物 熟女天天爽夜夜爽 动漫洲国产精品无码专区2D 国产办公室aⅴ无码精品视频 免费午夜爽爽爽www视频十八禁 欧美国产一区二区三区精品 欧洲亚洲成av人片天堂网无码 国产女极品在线观看AV 性国产三级在线 欧美日韩亚洲中文字幕三 日产区一线二线三线A7778 曰批全免费视频观看 热久久九九久久九九 尤物92福利视频午夜1000合集 91久久国产精品 多人精品无码在线观看 亚洲香蕉精品刺激一区二区 亚洲无码精品一区 日本道中文字幕久久一区 少妇无码精油按摩专区精品 Av精品国产一区二区三区在线 亚洲中文乱码在线观看AV 欧美伊人久久大香线蕉综合 日本高清一级片 久久国产热视频 日韩伦理片中文字幕高清无码 一卡2卡3卡4卡免费观看久久精品成人 野花高清完整在线观看 午夜剧场在线播放 国产精品主播在线一区 日韩欧美综合专区一区 亚洲色婷婷综合久久二区 国产一级一片免费播放视频 成人欧美精品一区二区不卡 激情文学小说区另类小说同性 国产A亚洲综合 一级毛片免费观看久 亚洲欧洲自拍另类校园 久久不卡免费视频 狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久AV 日本国产精品 亚洲中文无码不卡av在线 1000部无遮挡拍拍拍免费视频观看 free性开放小少妇 天天影视网色香欲综合网久久 四虎永久在线精品 人人鲁人人莫人人爱精品 日韩一本到欧美国产亚洲 欧美另类69XXXX 久久人妻丝袜无码中文字幕 亚洲无码一卡 婷婷色婷婷开心五月四房播播 亚洲伊人精品综合在合线 国产91精品太粉嫩高中在线观看 久久网精品视频 成人在线一区二区三区 国产亚洲色婷婷久久99精品91 欧美日韩无套内射另类 亚洲中文一本无码AV在线无码 一级肉体全黄裸片 欧美一区二区三区激情电影 性xxxx视频播放免费 精品日產一區二區三區手機 亚洲国产成人精品无码一区二区 不卡的AV在线播放 狠躁天天躁无码中文字幕 免费观看a毛片一区二区不卡 国产在线视精品在一区二区 日本一区深夜影院深a 国产婷婷一区二区视频 2021国产精品视频 亚洲污片在线观看 中文乱码字幕在线播 国产高清高潮好爽流水在线播放 黄页视频免费在线观看 亚洲A∨无码专区国产乱码D∨D 一区国产二区亚洲三区另类 亚洲综合一区二区精品久久 成人黄色网站在线播放视频 99re国产在线播放精品66 中文无码日韩欧 久久99爰这里有精品国产 精品一区二区三区AV天堂 制服丝袜亚洲中文综合 国产成人无码专区 日韩电影无码A不卡 福利在线欧美观看 午夜精品久久久久久99热 亚洲色偷偷综合亚洲aⅴ伊人 久久99看黄毛片免费 婷婷五月天成人小说 国产精品久久亚洲一区二区 思思RE热免费精品视频66 欧美日韩色 亚洲人成中文字幕在线观看 再深点灬舒服灬受不了了视频 亚洲中文字幕日本无线码 夜夜爽免费888视频 超碰97人人模人人爽人人喊 亚洲欧美另类图片 色欲综合久久躁天天躁蜜桃 天天看在线视频国产 在线观看日本免费A∨电影 欧洲色综合天天在线影院 亚洲日韩久久精品无码蜜桃臀 国产老色批在线视频播放 国产女人与黑人精品中文 亚洲天堂中文字幕在线观看 人摸人人澡人人超碰 国产又粗又大 国产乱码一区二区三区精品 中文字幕精品乱码亚洲一区 无码在线不卡视频 亚洲AⅤ在线无码播放毛片一线天 中文字幕伊人久久网 国产美女一级毛片精品久久久 中文人妻免费无码区 在线无码VA中文字幕无码 免费在线看视频 久久久久国产精品亚洲蜜桃 国语国产自产精品 一区欧美二区日韩在线 亚洲日产韩国一二三四区 天天躁夜夜躁狠狠躁图片swag 里菜的痛3d游乐场卡住 无码中文精品专区一区二区 啦啦啦中文中国免费高清在线 av中文字幕在线观看 伊人一道本东京久久人爱 免费AV电影在线观看 日韩亚洲高清中文字幕 两个人免费观看日本的 成人免费看片网站 欧美影视一区二区三区
文昌市| 安新县| 邵武市| 托克逊县| 利川市| 太原市| 华坪县| 正蓝旗| 博白县| 鄂托克前旗| 镇安县| 介休市| 西林县| 北辰区| 电白县| 民和| 壤塘县| 白朗县| 申扎县| 贵定县| 拉萨市| 扎囊县| 彭州市| 阳朔县| 元江| 宁化县| 北海市| 乌什县| 漳州市| 祁阳县| 聂荣县| 衢州市| 公安县| 信宜市| 雅安市| 永丰县| 原阳县| 定陶县| 内黄县| 祁东县| 汝城县|