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禽白血病抗原檢測(cè)試劑盒現(xiàn)貨

點(diǎn)擊次數(shù):1307     更新時(shí)間:2020-07-29

禽白血病抗原檢測(cè)試劑盒現(xiàn)貨?

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【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
        
ALV可引起不同的腫瘤性疾病,包括淋巴白血病、成紅細(xì)胞瘤、成髓細(xì)胞瘤等。p27是ALV病毒群(A,B,C,D,E和J亞群)的主要gs抗原,高度保守,因而p27抗原的檢測(cè)是ALV抗原檢測(cè)的基礎(chǔ)。
        本試劑用于檢測(cè)p27,采用稀蛋清和泄殖腔拭子樣品進(jìn)行檢測(cè),雖然血清在ALV抗原的檢測(cè)中是有效的,但由于潛在內(nèi)源性病毒序列的干擾,因而在外源性病毒的檢測(cè)中不采用血清樣品。在p27抗體包被96孔反應(yīng)板中,樣品中的p27抗原與包被的抗體可以形成復(fù)合物。洗掉未結(jié)合的物質(zhì)后,再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗p27抗體,后者與結(jié)合在孔中的p27結(jié)合。隨后,洗掉未結(jié)合的標(biāo)記物,加入底物液,生成的顏色與檢測(cè)樣品中的p27含量有關(guān)。由于蛋清較粘稠,本說(shuō)明書(shū)介紹了改進(jìn)的樣品處理/洗滌方法。
產(chǎn)品用途 
        禽白血病抗原檢測(cè)試劑盒(ALV Ag)是用于檢測(cè)雞血清、泄殖腔拭子和蛋清樣品中的禽白血病病毒(ALV)p27抗原的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒。
【產(chǎn)品內(nèi)容】

試劑盒主要成分數(shù) 量
抗p27抗體包被板96T×2
陽(yáng)性對(duì)照 0.8ml×1
陰性對(duì)照 0.8ml×1
酶標(biāo)記抗體20ml×1
樣品稀釋液45ml×2
底物液 24ml×1
終止液24ml×1
20×濃縮洗滌液45ml×2
封口膠2份
使用說(shuō)明書(shū)1份

【用法與判定】 按以下步驟進(jìn)行:
1需要自備的器材
1.1精密單道移液器和多道移液器
1.2一次性吸頭,
1.3 96孔酶標(biāo)儀
1.4樣品稀釋試管,
1.5蒸餾水或去離子水,
1.6洗滌溶液滴加和吸取裝置(洗板機(jī))
操作步驟中列出的試劑體積要求移液器誤差不超過(guò)±5%
2、樣品的準(zhǔn)備
蛋清—收集稀蛋清,無(wú)需稀釋直接加到ELISA反應(yīng)板中。凍融樣品可降低其粘稠度。
泄殖腔拭子—將泄殖腔拭子加到1mL培養(yǎng)液中或樣品稀釋液中冷凍。檢測(cè)前,將樣品恢復(fù)至18-26℃,讓雜質(zhì)沉淀下來(lái)。吸取100 μL上清,加到ELISA反應(yīng)板中。
血清—用于p27的常規(guī)檢測(cè),無(wú)需稀釋血清樣品直接加到反應(yīng)板中。因?yàn)閮?nèi)源性病毒的干擾作用,不使用血清樣本進(jìn)行外源病毒p27的檢測(cè)。
3操作步驟 (適用于蛋清以外的樣品)
使用前應(yīng)輕輕旋轉(zhuǎn)或震蕩予以混勻,所有試劑應(yīng)恢復(fù)至室溫
3.1 取出抗體包被板,記錄樣品的位置。
3.2 在適當(dāng)?shù)膬煽字蟹謩e加入100μL未稀釋的陰性對(duì)照。
3.3 在適當(dāng)?shù)膬煽字蟹謩e加入100μL未稀釋的陽(yáng)性對(duì)照。
3.4 在剩余的孔內(nèi)分別加入100μL被檢樣品。樣品既可采用雙孔檢測(cè)也可采用單孔檢測(cè)。樣品無(wú)需稀釋用于檢測(cè)。
3.5. 蓋好反應(yīng)板蓋板,在18-26℃條件下孵育60分鐘(±5分鐘)。
3.6 用大約350μL蒸餾水或去離子水洗滌板孔,重復(fù)3-5次。一次洗板后將液體拍干。
3.7 每孔加入100μL酶標(biāo)抗體。
3.8 蓋好反應(yīng)板蓋板,在18-26℃條件下孵育60分鐘(±5分鐘)。
3.9 重復(fù)步驟3.6。
3.10. 每孔加入100μLTMB底物液。
3.11 蓋好反應(yīng)板蓋板,在18-26℃條件下孵育15分鐘(±1分鐘)。
3.12每孔加入100μL終止液終止反應(yīng)。
3.13.測(cè)量并且記錄樣品和對(duì)照于650nm波長(zhǎng)的吸光值A(chǔ)(650)。
蛋清樣品洗滌方法
稀蛋清樣品有時(shí)很難用上述標(biāo)準(zhǔn)的方法,用水*從反應(yīng)板上洗掉。本試劑盒準(zhǔn)備了20倍濃縮洗滌液,用于蛋清樣品的洗滌。
洗滌溶液的制備
20倍濃縮洗滌液應(yīng)恢復(fù)至18-26℃并使沉淀的鹽溶解混勻。使用前,用蒸餾水或去離子水對(duì)蛋清濃縮洗滌液應(yīng)進(jìn)行20倍稀釋?zhuān)ɡ纾好堪逵?0mL濃縮洗滌液加入380mL水中)。蛋清樣品洗滌步驟
除了步驟3.6和步驟3.9的洗滌方法外,蛋清樣品的檢測(cè)步驟與上述步驟相同。吸出對(duì)照和被檢蛋清樣品孔中的液體,每孔加入大約350μL上述制備的洗滌溶液,浸泡兩分鐘,吸出孔中液體。再重復(fù)4次,但每次不用再浸泡2分鐘。
4結(jié)果判定
陽(yáng)性對(duì)照的平均值減去陰性對(duì)照的平均值(PC`x-NC`x)必須大于0.200,陰性對(duì)照平均值必須小于或等于0.150,試驗(yàn)方能有效。被檢樣品中是否含有p27抗原與其A(650)和陽(yáng)性對(duì)照的平均值的比值有關(guān)。陽(yáng)性對(duì)照已經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化處理,代表顯著的抗原水平(大約10ng/mL)。被檢樣品抗原的相對(duì)含量通過(guò)計(jì)算樣品與陽(yáng)性對(duì)照比值(S/P)來(lái)確定。如果S/P小于等于0.20,樣品為陰性;如果S/P大于0.20,說(shuō)明樣品中存在p27抗原。
5、計(jì)算公式

【注意事項(xiàng)】
1.認(rèn)真處理所有的ALV材料以免ALV的傳播,陽(yáng)性對(duì)照可能成為ALV的傳染源,盡管陽(yáng)性對(duì)照已經(jīng)過(guò)化學(xué)處理滅活,但不能認(rèn)為其*滅活。
2.試劑盒的一些成分含有疊氮鈉作為防腐劑。
3.處理各組分要按照當(dāng)?shù)亍^(qū)域以及國(guó)家規(guī)定進(jìn)行。
4.不要將TMB暴露于強(qiáng)光和任何氧化劑下,所有的試劑應(yīng)在2-8℃儲(chǔ)存,所有的廢棄液應(yīng)在丟棄前合理處理以免污染。
5.不要使用超過(guò)有效期的試劑,不同批次的試劑盒成分不要混用。在整個(gè)操作過(guò)程中,仔細(xì)的滴加和洗滌對(duì)結(jié)果的精確性和準(zhǔn)確度是十分重要的。
6.按照本程序操作,將會(huì)獲得佳結(jié)果。
7.于獸醫(yī)使用。
【規(guī)格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2~8℃避光保存,有效期為12個(gè)月

 

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